Чи варто вірити БІОТЕСТ? Статистична обробка результатів біотестування.

0 24

Розраховані величини t d порівнюють із значеннями критерію Стьюдента ( t St ) для рівня значущості Р = 0,05 і ступеня свободи n до + n т – 2.

Якщо розрахована величина t d більше або дорівнює значенню критерію Стьюдента ( t dt St ), то відмінність між величинами показника в контрольній або тестируемой воді достовірно. В цьому випадку вважають, що тестована вода надає хронічне токсичну дію на дафній.

Якщо розрахована величина t d менше t St , то відмінність між порівнюваними величинами недостовірно. Тестована вода не робить хронічного токсичної дії на дафній, якщо відмінності від контролю показників виживання і плодючості не достовірні.

Результати біотестування разбавлений тестируемой води з метою їх використання при встановленні величин ПДС або визначення ступеня хронічного токсичної дії, що тестується води обробляють за допомогою вищеописаних прийомів. Визначають мінімальну кратність розведення тестируемой води, при якій відмінності між величинами показників виживання і плодючості дафній в контролі і відповідному розведенні будуть недостовірними.

Якщо отримують дві різні величини мінімальної кратності розбавлення тестируемой води (одну, при якій недостовірним буде відміну від контролю показника виживання, і іншу, при якій недостовірним виявиться відміну від контролю показника плідності), висновок про відсутність хронічного токсичної дії на дафній роблять на підставі більшої величини .

Питання для самопідготовки

1. Що таке токсичність як характеристика відходів виробництва будівельних матеріалів?

2. З чим пов’язано використання нижчих організмів для проведення експрес-токсикологічної оцінки матеріалів?

3. Що є основним біологічним показником при виявленні гострого токсичного дії водної витяжки будівельних зразків методом короткочасного і тривалого біотестування?

4. Критерій токсичності водних витяжок. Що означає показник А?

5. Приготування водної витяжки. Контрольна середовище.

6. Охарактеризуйте культуру Daphnia magna , яка у ролі тест-об’єкта. Умови культивування рачків.

7. Методика біотестування при використанні рачків роду дафнії.

8. Що таке ЛКР 50-96 і ЛКР 0-96 ? Уявіть графічний метод визначення зазначених величин.

9. Як графічним методом визначити середній час виживання 50% особин (ЛТ 50 )?

3.3. Оцінка фунгіцидних властивостей промислових відходів

Хімічний захист матеріалів від біопошкоджень заснована на використанні біологічно активних хімічних речовин або препаратів на їх основі, здатних запобігати розвитку, послаблювати життєдіяльність або знищувати організми, що викликають пошкодження або повне руйнування матеріалів, окремих конструкцій або об’єктів в цілому. Такі речовини і препарати називають іноді біоцидами, захисними засобами, окремі з них – антисептиками, технічними пестицидами, препаратами комплексного захисного дії.

Оскільки біологічні пошкодження можуть бути викликані різними організмами, виділяють наступні хімічні речовини, призначені для захисту від них:

а) фунгіциди – для захисту від різних видів грибів, які пошкоджують матеріали;

б) бактерициди – для захисту від різних видів бактерій;

в) альгіциди і моллюськоциди – для захисту від обростання в водному середовищі відповідно водоростями і молюсками трубопроводів, гідротехнічних споруд, морських суден, систем водопостачання та меліорації і т.д .;

г) інсектициди – для захисту деревини, полімерних або інших матеріалів від червиць, термітів та інших комах;

д) гербіциди – для захисту від небажаних для проростання рослин на міських територіях, будівельних майданчиках, узбіччях автомобільних і насипах залізниць, аеродромах, вимощення будівель, пам’ятниках архітектури і т. д .;

е) зооциди – для захисту від хребетних тварин-шкідників (відповідно родентициди – для захисту від щурів, мишей і інших гризунів, авіціди – для захисту від птахів в містах і особливо на аеродромах).

Як хімічних засобів захисту знаходять застосування речовини, що відносяться до різних класів хімічних сполук, в тому числі:

– неорганічні сполуки (оксиди і солі хрому, міді, бору, цинку, миш’яку та ін.);

– органічні сполуки (феноли і хлорфеноли, похідні карбонових, оксикарбонових, карбамінової і тіокарбамінової кислот, гетероциклічні та інші сполуки);

– елементоорганіческіе і комплексні сполуки (олова, міді, свинцю, миш’яку, кремнію, ртуті та ін.).

Біоцидниє препарати можуть являти собою суміші різних речовин, що підсилюють активність окремих компонентів (синергисти). По агрегатному стані біоциди бувають тверді (порошки), рідкі та газоподібні (фуміганти, летючі фунгіциди та ін.).

Хімічний захист від біопошкоджень здійснюють в основному або застосуванням в спорудах, виробах або конструкціях спеціальних матеріалів, що містять біоциди (біостійких матеріалів), або шляхом обробки або просочення, що захищаються біоцидними препаратами.

Застосовувані для тривалого захисту матеріали з підвищеною биостойкостью отримують наступними способами:

введенням до складу композиційних (сумішевих) матеріалів (пластики, плівки, гуми, емалі, бетони і т.д.) в процесі їх виготовлення спеціальних біоцидних добавок;

глибоким просоченням пористих і волокнистих матеріалів відповідними захисними засобами;

використанням (в якості одного з компонентів) речовин, що містять в молекулі функціональні угруповання з біоцидними властивостями: полімерні зв’язуючі, пластифікатори, наповнювачі, армуючі матеріали.

Для тимчасового захисту обробляють біоцидами поверхню захищаються матеріалів або навколишнього середовища (грунту, води, повітря).

Основний збиток будівельним матеріалам і конструкціям заподіюють мікроорганізми, перш за все цвілеві гриби.

Застосовувані для облицювання пористі силікатні матеріали (білий цемент, туф, черепашник) для захисту від ураження пліснявими грибами обробляють рідинами з добавками хлористого цинку і мідного купоросу.

Запобігти цвілеві поразки на гіпсобетонних стінах, покритих олійно-клейової шпаклівкою, можна добавкою в гіпсобетону, шпаклівку і фарбу 0,02%. 0,05% олово-органічного біоциду ластанокса, а також 2-оксидифенил і фтористого кальцію.

Грибостійкість побелочних розчинів забезпечують за допомогою добавок 1,5. 2,0% фтористого натрію або кремнефтористого натрію.

Для захисту від біопошкоджень цементних підлог на цукрових і пивоварних заводах до цементу в якості біоциду додавали 10% тонкоизмельченного мідного порошку і оксихлорід магнію. В результаті утворювався оксихлорід міді, що володіє фунгіцидною і бактерицидну дію.

Для додання грибостійкості лінолеуму в латекс вводять такі біоциди, як 2-оксидифенил і кремнефторістий амоній.

В умовах підвищеної небезпеки биоповреждений рекомендується використовувати лакофарбові матеріали, що містять:

а) неорганічні пігменти – оксид цинку, закис міді, метаборат барію і ін.

б) органічні біоциди – пентахлорфенол, 8-оксіфенолят міді та ін.

в) елементорганічних з’єднання олова, свинцю, миш’яку, ртуті.

Суть методу полягає у виявленні характеру росту грибів на поверхні матеріалу і наявності або відсутності ингибиторной зони (зони відсутності росту гриба) навколо випробовуваних зразків відходів, поміщених на тверду живильне середовище для вирощування гриба.

Устаткування і матеріали: зразки аналізованих відходів, суспензія гриба, середа Чапека-Докса з агаром, чашки Петрі, скляний шпатель, скляна піпетка з вихідним отвором в 1 мм, водяний термостат.

Порядок виконання роботи та обробка результатів.

1. Приготування суспензії спор гриба. У колбу або стаканчик, що містить 50 см 3 стерильної дистильованої води перенести сухі суперечки і ретельно перемішати струшуванням і розтиранням скляною паличкою з гумовим наконечником до поділу всіх грудочок. Приготовану суспензію відфільтрувати через чотири шари стерильної марлі. Концентрацію суперечка гриба підрахувати за допомогою лічильної камери Горяєва або фотоелектричного концентраційного колориметра (КФК-2). Використовувана для випробувань суспензія спор грибів повинна становити 1. 2 млн / см 3.

2. Приготувати живильне середовище Чапека-Докса з агаром.

3. У чашки Петрі розлити розігріту середу в кількості 10. 20 см 3 і дати застигнути.

4. На поверхню середовища нанести кілька крапель суспензії гриба, скляним шпателем рівномірно розподілити її по поверхні, дати трохи підсохнути. Одну з чашок з висіяної суспензією гриба вибрати як контрольний варіант.

5. У центр чашки із середовищем помістити пробу використовуваного відходу (сипучого, в кількості 2. 3 см 3). Піпеткою з вихідним отвором 1 мм нанести кілька крапель суспензії гриба на поверхню проби (змочити зразок). Кілька хвилин витримати на повітрі, після чого чашки закрити.

6. Чашки Петрі з зараженими зразками і контрольний варіант помістити в термостат з температурою 29 2 ° С і вологістю 80. 90% на 14 діб.

7. Через зазначений час зробити огляд зразків. Ступінь розвитку цвілевих грибів на поверхні зразків відходів визначити по табл. № 8 (див. Лабораторну роботу № 3), фунгіцидні властивості відходу – по табл. № 3.2.

Оцінка фунгіцидних властивостей матеріалів

Поняття про біотестування і тест-об’єкти

Биотестирование (bioassay) – це процедура встановлення токсичності середовища за допомогою тест-об’єктів, що сигналізують про небезпеку незалежно від того, які речовини і в якому поєднанні викликають зміни життєво важливих функцій у тест-об’єктів.

Тест-об’єкт (test organism) – організм, який використовується при оцінці токсичності середовища (хімічних речовин, природних і стічних вод, грунтів, донних відкладень, кормів та ін.)

Т ест-функція (test function) – це ж ізненная функція або критерій токсичності (toxicity criterion), які використовуються для характеристики відгуку тест-об’єкта на шкідливу дію середовища.

Тест функції для різних організмів

• для інфузорій, ракоподібних, ембріональних стадій молюсків, риб, комах – виживаність (смертність) тест-організмів.

• для ракоподібних, риб, молюсків – плодючість, поява аномальних відхилень у ранньому ембріональному розвитку організму, ступінь синхронності дроблення яйцеклітин.

• для культур одноклітинних водоростей і інфузорій – загибель клітин, зміна (приріст або спад) чисельності клітин в культурі, коефіцієнт ділення клітин, середня швидкість росту, добовий приріст культури.

• для рослин – енергія проростання насіння, довжина первинного кореня і ін.

види биотестов

Гострі біотести (acute tests) за показниками виживаності, тривають від декількох хвилин до 24-96 год.

Короткострокові (short-term chronic tests) хронічні тести тривають протягом 7 діб і закінчуються, як правило, після отримання першого покоління тест-об’єктів.

Хронічні тести (chronic tests) на загальну плодючість ракоподібних, що охоплюють 3 покоління.

Алгоритм виконання біотестування

Відбір проби середовища (вода, донні відкладення, грунт). Проби не підлягають консервації хімічними речовинами або заморожування

Підготовка досліджуваних проб (приготування водних витяжок донних відкладень, внесення в пробу необхідних хімічних речовин, підготовка проб грунтів і т.д.)

Підготовка проб порівняння (незабруднене середа)

Внесення тест-об’єкта в досліджувану пробу і пробу порівняння

Витримка проб в певних умовах певний час

Визначення відгуку тест-об’єктів на дію середовища. Проводиться візуально або за допомогою приладів

Вам также могут понравиться

Оставьте ответ

Ваш электронный адрес не будет опубликован.